质粒导入感受态细胞
BL21转化
- 开超净台
- 将质粒和感受态细胞取出放于冰上，放入超净台解冻4min
- ep管：50微升BL21感受态细胞+10微升质粒（务必轻轻混匀）冰上25min（20-30min） 步骤：- 取BL21 50微升放入ep管内，加入质粒10 微升 轻轻混匀，放在冰上25min。（BL21 一个ep管含有100微升）
- 42℃热激1min30s（BL21） ，如果T1感受态则30s
- 热激完迅速放于冰上2min
- 超净台 向ep管中加入500微升LB培养基，摇床37℃ 180r 1h。
- 离心 8000xg以下 1 min 去除上清液450微升，将剩下的液体和菌液重悬涂板
- 37℃培养箱培养12h